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聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,为最常用的分子生物学技术之一。典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。 PCR能快速特异扩增任何已知目的基因或DNA片段,并能轻易在皮克(pg)水平起始DNA混合物中的目的基因扩增达到纳克、微克、毫克级的特异性DNA片段。因此,PCR技术一经问世就被迅速而广泛地用于分子生物学的各个领域。它不仅可以用于基因的分离、克隆和核苷酸序列分析,还可以用于突变体和重组体的构建,基因表达调控的研究,基因多态性的分析,遗传病和传染病的诊断,肿瘤机制的探索,法医鉴定等诸多方面。通常,PCR在分子克隆和DNA分析中有着以下多种用途: (1) 生成双链DNA中的特异序列作为探针; (2) 由少量mRNA生成 cDNA文库; (3) 从cDNA中克隆某些基因; (4) 生成大量DNA以进行序列测定; (5) 突变的分析; (6) 染色体步移; (7) RAPD、AFLP、RFLP等DNA多态性分析等。
its
英 [ɪts] 美 [ɪts]
pron. 它的
n. (Its)人名;(俄)伊茨
短语
ITS sequence ITS区 ; ITS序列 ; its区序列 ; its测序
ItS Delicious 味道好极了 ; 美味佳肴
ITS区 ITS sequence ; ITS region
its ok 网络歌手 ; 其确定 ; 没关系 ; 不一样
its growing 它的增长 ; 它日益 ; 其增长
扩展资料
its的主格和宾格
it
英 [ɪt] 美 [ɪt]
pron. [指无生命的东西、动物、植物]它;这;那
pron. 指已提到或将提及的事物、活动、经验、抽象观念等
pron. 在不分性别或情况不详时指代
pron. 作无人称动词的主语,表示天气、时日、距离、状态、温度等等
abbr. 信息技术information technology
短语
IT University 哥德堡
it depends 看情况 ; 看情况而定 ; 视情况而定
Pump It 加油 ; 黑眼豆豆 ; 跳起来 ; 发功
用法
用it作人称代词,可替代无生命的东西或事情,在性别不详或无所谓时,也可指代人,尤其是指婴儿。
it作主语时,可指自然现象、季节、时间、距离、环境等。
it可以作先行词,用于强调句型中,强调主语、宾语、时间状语、地点状语、介词宾语或从句等,强调句型中的it一般指已发生过的事,而不指尚未发生或提及的事。
真菌性角膜炎是由病原真菌引起的高度致盲性角膜炎。随着抗生素和糖皮质激素的广泛使用,发病率不断上升。培养法曾作为真菌性角膜炎诊断的金标准,但实际诊断效果并不理想。在真核生物的核糖体DNA中,ITS序列是一个非编码区,其长度和序列在不同物种之间有很大差异,因此可以用于不同真菌的分类和鉴定。
山东第一医科大学附属青岛眼科医院教授黄宇森及其团队在《临床微生物学与感染》上发表研究论文,通过高通量ITS测序描述了健康人眼表面的共生真菌群落。结果表明,桔青霉、黑曲霉、木霉。和木霉属。用培养基法从8.9%正常人的结膜囊中分离。ITS序列测定法可在属水平上鉴定94种真菌。
高通量测序方法为进一步研究真菌菌群在眼睛健康和疾病中的潜在作用奠定了基础,也提示眼表共生真菌的存在似乎削弱了常规培养方法作为疾病病原学诊断的可信度。结果表明,高通量ITS测序方法在一定程度上质疑了真菌培养物中病原菌鉴定的准确性。高通量ITS序列测定可作为真菌性角膜炎病原学诊断的辅助方法。研究人员指出,尽管培养法一直被认为是真菌性角膜炎病原学诊断的金标准,但它仍有许多缺点。
首先,不同的真菌有时会表现出相似的外观,而同一种真菌也可以表现出不同的形态特征,所以对培养结果的判断很大程度上取决于检验者的经验。第二,真菌通常生长缓慢。第三,一些病原真菌不适合医院使用的普通真菌培养基。第四,一些经验性处理或入院前处理会降低真菌的活性,影响培养结果。第五,培养方法的结果可能是眼表共生真菌群落中最适合所选培养基的真菌。
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